Plásmido Doble Nickase (h) SIP1/ZEB2: sc-400655-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SIP1/ZEB2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SIP1/ZEB2 (h) y el plásmido de doble nickasa SIP1/ZEB2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZEB2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SIP1/ZEB2 | sc-400655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SIP1/ZEB2 | sc-400655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZEB2 (también conocido como SIP1) codifica un factor de transcripción con dedos de zinc que se une a E-box y que funciona predominantemente como un represor transcripcional, controlando la transición epitelio‑mesénquima, la especificación de linaje y las decisiones de destino celular. Al unirse a motivos E-box y reclutar complejos correpresores asociados a CtBP/SMAD, SIP1/ZEB2 integra la señalización de TGF‑β/BMP con programas de remodelación de la cromatina para modular genes de polaridad epitelial, adhesión celular y fenotipos migratorios. Las redes transcripcionales dependientes de ZEB2 contribuyen al desarrollo de la cresta neural y a la diferenciación de células inmunitarias, y la desregulación de su expresión o actividad se asocia con síndromes del desarrollo y con estados de diferenciación alterados en contextos relevantes para el cáncer. Estas propiedades hacen de ZEB2 un nodo ampliamente utilizado en estudios mecanísticos del control transcripcional, la plasticidad y el acoplamiento entre señalización y expresión génica.
SIP1/ZEB2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZEB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZEB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZEB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZEB2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.