Plasmide Double Nickase (h) Sialyltransferase 7A: sc-406723-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sialyltransferase 7A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sialyltransferase 7A Double Nickase (h) et le plasmide Sialyltransferase 7A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ST6GALNAC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sialyltransferase 7A | sc-406723-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sialyltransferase 7A | sc-406723-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GALNAC1 code la sialyltransférase 7A, une glycosyltransférase résidente de l’appareil de Golgi qui transfère de l’acide sialique sur des O‑glycanes contenant du GalNAc afin de générer des structures α2,6‑sialylées telles que le sialyl‑Tn. En modulant l’O‑glycosylation de type mucine, elle influence le trafic des glycoprotéines, les interactions cellule–cellule et cellule–matrice, ainsi que la signalisation médiée par les lectines au sein des voies de sialylation et de biosynthèse des glycoconjugués. Une activité altérée de ST6GALNAC1 est associée à des profils glycanes aberrants observés dans la biologie épithéliale et la reconnaissance immunitaire. Une sialylation dérégulée des O‑glycanes a été reliée à des modifications de l’adhérence, à des phénotypes liés à l’invasion et à des glycoépitopes associés aux tumeurs dans de multiples contextes oncologiques, ce qui étaye sa pertinence pour les études mécanistiques des maladies axées sur la glycomique.
Sialyltransferase 7A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ST6GALNAC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ST6GALNAC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ST6GALNAC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ST6GALNAC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.