Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO SH3BGRL (h): sc-406958
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SH3BGRL Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SH3BGRL, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SH3BGRL Antibody (E-5): sc-377108
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SH3BGRL (h) | sc-406958 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SH3BGRL (SH3 domain binding glutamate rich protein like) code une petite protéine de type adaptateur capable de moduler les interactions protéine–protéine impliquant des complexes de signalisation à domaine SH3. Elle a été associée à la régulation de la dynamique du cytosquelette, à des voies de signalisation sensibles à l’état rédox et à des voies liées au stress qui influencent les décisions de croissance cellulaire et de survie. Une expression altérée de SH3BGRL a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux et a été étudiée en lien avec le comportement invasif et des modifications de la signalisation proliférative. Ces caractéristiques font de SH3BGRL une cible pertinente pour des travaux mécanistiques sur la transduction du signal, la régulation des états cellulaires et le remodelage des voies dans des modèles de maladie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SH3BGRL (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SH3BGRL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SH3BGRL, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SH3BGRL à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SH3BGRL.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SH3BGRL pour l'étude de la signalisation de SH3BGRL, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SH3BGRL essentiels à la fonction de SH3BGRL
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SH3BGRL pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SH3BGRL plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SH3BGRL plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SH3BGRL. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SH3BGRL plasmide HDR (h) et le SH3BGRL (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SH3BGRL pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SH3BGRL définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.