Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SGTA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424626
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SGTA El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SGTA, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SGTA Anticuerpo (6A4): sc-130557
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SGTA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424626 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Sgta** de ratón codifica la **proteína alfa pequeña rica en glutamina con repeticiones tetratricopeptídicas** (SGTA), un co-chaperón citosólico que se une a complejos **HSP70/HSP90** y reconoce proteínas cliente hidrofóbicas a través de sus dominios **TPR**. SGTA participa en el control de calidad de proteínas nacientes y mal localizadas, coordinando decisiones de selección entre las vías de plegamiento, direccionamiento a membrana y degradación proteasomal. Se ha implicado en el manejo de proteínas ancladas por cola (tail-anchored) mediado por **BAG6/GET** y en la regulación del recambio dependiente de ubiquitina, vinculando a SGTA con la proteostasis y las respuestas celulares al estrés. Las vías de homeostasis proteica desreguladas en las que participa SGTA son relevantes para estudios mecanísticos de neurodegeneración, adaptación al estrés en células cancerosas y trastornos de la biogénesis de proteínas de membrana.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SGTA (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sgta en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sgta junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sgta tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SGTA.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sgta para la investigación de la señalización de SGTA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Sgta críticos para la función de SGTA
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sgta para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SGTA CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SGTA CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sgta. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SGTA (m) y el plásmido HDR SGTA (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sgta para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sgta definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.