SerpinB6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417434

Descripción general

SERPINB6 codifica SerpinB6, un inhibidor intracelular de proteasas de serina del clado B que contribuye a la citoprotección al neutralizar la actividad proteolítica aberrante y limitar el daño celular impulsado por la proteólisis. Al restringir las proteasas de serina en el citosol y el núcleo, SerpinB6 favorece la proteostasis y los procesos de respuesta al estrés que influyen en la supervivencia celular, la diferenciación y la señalización inflamatoria. La expresión de SERPINB6 es especialmente relevante en contextos epiteliales e inmunitarios, donde el equilibrio proteasa–antiproteasa determina la función de barrera y la homeostasis tisular. La actividad desregulada de las serpinas se ha asociado con una susceptibilidad alterada al estrés proteotóxico y a la patología inflamatoria, lo que convierte a SERPINB6 en una diana útil para estudios mecanísticos del control intracelular de proteasas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SerpinB6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SERPINB6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SERPINB6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SERPINB6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SerpinB6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SERPINB6 para la investigación de la señalización de SerpinB6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SERPINB6 críticos para la función de SerpinB6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SERPINB6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SerpinB6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SerpinB6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SERPINB6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SerpinB6 (h) y el plásmido HDR SerpinB6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SERPINB6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SERPINB6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.