SerpinB6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417434

Übersicht

SERPINB6 kodiert SerpinB6, einen intrazellulären Serinprotease-Inhibitor der Klade B, der zur Zytoprotektion beiträgt, indem er fehlgeleitete Proteaseaktivität neutralisiert und proteolysebedingte Zellschäden begrenzt. Indem SerpinB6 Serinproteasen im Zytosol und Zellkern in Schach hält, unterstützt es die Proteostase sowie Stressantwortprozesse, die das Zellüberleben, die Differenzierung und inflammatorische Signalwege beeinflussen. Die Expression von SERPINB6 ist besonders in epithelialen und immunologischen Kontexten relevant, in denen das Protease–Antiprotease-Gleichgewicht die Barrierefunktion und Gewebehomöostase prägt. Eine fehlregulierte Serpin-Aktivität wurde mit einer veränderten Anfälligkeit für proteotoxischen Stress und entzündliche Pathologien in Verbindung gebracht, wodurch SERPINB6 ein nützliches Ziel für mechanistische Studien zur intrazellulären Proteasekontrolle darstellt.

Das SerpinB6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SERPINB6-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SERPINB6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SERPINB6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SerpinB6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SERPINB6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SerpinB6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SERPINB6-Exone abzielen, die für die SerpinB6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SERPINB6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SerpinB6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SerpinB6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SERPINB6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SerpinB6 HDR-Plasmid (h) und SerpinB6 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SERPINB6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SERPINB6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.