Plasmide Double Nickase (h) Septin 9: sc-403987-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 9 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Septin 9 Antibody (2C6): sc-293291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 9 | sc-403987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Septin 9 | sc-403987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEPT9 code la septine 9, une protéine du cytosquelette liant le GTP qui s’assemble en filaments de septines hétéro-oligomériques et agit comme barrière de diffusion ainsi que comme plateforme d’ancrage pour des processus associés à l’actine et aux microtubules. La septine 9 contribue à la cytokinèse, au trafic vésiculaire, à la polarité cellulaire et au remodelage membranaire, et a été impliquée dans la régulation de la progression mitotique et de l’architecture cellulaire. Une expression altérée de SEPT9 ou une perturbation génomique est associée à des défauts de division cellulaire et d’organisation du cytosquelette, et une dysrégulation de SEPT9 a été rapportée dans divers contextes cancéreux ainsi que dans d’autres troubles impliquant une prolifération aberrante et une organisation tissulaire anormale. Ces propriétés font de la septine 9 un nœud d’étude utile pour analyser la dynamique du cytosquelette, la fidélité de la mitose et les conséquences au niveau des voies de signalisation des perturbations du réseau de septines.
Septin 9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.