Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine2): sc-437342

Übersicht

Selenoprotein P (SELENOP) ist ein sekretiertes Glykoprotein, das besonders reich an Selenocysteinresten ist und bei Säugetieren als zentraler Faktor für den Transport und die Speicherung von Selen dient. Es unterstützt die systemische Verteilung von Selen sowie die Redoxhomöostase. Zur antioxidativen Abwehr trägt es bei, indem es Selen für die Biosynthese von Selenoenzymen bereitstellt und dadurch zelluläre Antworten auf oxidativen Stress, Entzündungen und Stress des endoplasmatischen Retikulums beeinflusst. In der Rinderbiologie ist SELENOP relevant für die hepatische Sekretion, die vaskuläre und metabolische Regulation sowie die selenabhängige Immunität und verknüpft den Selenstatus mit oxidativen Schäden und inflammatorischer Signalgebung. Eine dysregulierte SELENOP-Expression oder eine veränderte Selenverfügbarkeit ist mit veränderter Redoxsignalgebung und metabolischem Ungleichgewicht assoziiert, was SELENOP zu einem nützlichen molekularen Ansatzpunkt für die Untersuchung von Stressadaptationswegen und Nährstoff–Gen-Interaktionen macht.

Das Selenoprotein P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in bovine-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Selenoprotein P-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Selenoprotein P-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die Selenoprotein P-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Selenoprotein P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) und vom Selenoprotein P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Selenoprotein P HDR-Plasmid (bovine) und Selenoprotein P HDR-Plasmid (bovine2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.