Plasmide Double Nickase (m) selenocysteine lyase: sc-424520-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) selenocysteine lyase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide selenocysteine lyase Double Nickase (m) et le plasmide selenocysteine lyase Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Scly. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) selenocysteine lyase | sc-424520-NIC | 20 µg | $410.00 |
Chez la souris, le gène **Scly** code la **lyase de la sélénocystéine**, une enzyme dépendante du phosphate de pyridoxal (PLP) qui décompose la sélénocystéine en alanine tout en libérant du sélénium pour sa réutilisation. Cette activité contribue à l’homéostasie du sélénium et s’articule avec le métabolisme des sélénoprotéines en modulant le pool de sélénium biodisponible nécessaire aux voies antioxydantes et de régulation rédox. Par ses effets sur l’équilibre rédox cellulaire, la fonction de Scly est pertinente pour l’étude des réponses au stress oxydant et de la régulation métabolique dans les tissus sensibles au sélénium. Des altérations de la gestion du sélénium ont été associées à des phénotypes touchant le métabolisme énergétique et la résistance au stress, ce qui fait de Scly une cible utile pour des modèles mécanistiques de la biologie du sélénium.
selenocysteine lyase Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Scly dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Scly. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Scly. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Scly.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.