Plasmide CRISPR/Cas9 KO SCARA5 (h): sc-407005

Présentation

SCARA5 (scavenger receptor class A member 5) est un récepteur de reconnaissance des motifs à la surface cellulaire, impliqué dans la liaison et l’internalisation de ligands spécifiques, dont la ferritine, ce qui l’associe à la gestion du fer et à l’endocytose médiée par récepteur. Dans les cellules humaines, SCARA5 contribue à la régulation de l’adhésion et de la migration cellulaires et peut influencer les réponses de signalisation inflammatoire via des processus associés aux récepteurs scavengers. Une expression altérée de SCARA5 a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux ainsi que dans des microenvironnements fibrosants ou inflammatoires, où elle peut corréler avec des modifications des programmes épithélio-mésenchymateux et du remodelage de la matrice extracellulaire. Ces caractéristiques font de SCARA5 une cible utile pour des études mécanistiques sur la signalisation associée au fer, le trafic membranaire et la régulation, par le microenvironnement, du comportement cellulaire.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SCARA5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SCARA5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SCARA5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SCARA5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SCARA5.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SCARA5 pour l'étude de la signalisation de SCARA5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SCARA5 essentiels à la fonction de SCARA5
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SCARA5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SCARA5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SCARA5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SCARA5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SCARA5 plasmide HDR (h) et le SCARA5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SCARA5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SCARA5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.