Plasmide Double Nickase (h) SAP 18: sc-404214-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SAP 18 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SAP 18 Double Nickase (h) et le plasmide SAP 18 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SAP18. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SAP 18 Antibody (C-3): sc-365377
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SAP 18 | sc-404214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SAP 18 | sc-404214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SAP18** code la protéine SAP18, un composant central de la machinerie de répression transcriptionnelle **Sin3A/HDAC**, qui contribue à coupler des facteurs se liant à l’ADN de manière spécifique à la désacétylation des histones et à la compaction de la chromatine. Par sa participation au silençage génique dépendant des HDAC, SAP18 influence des programmes transcriptionnels impliqués dans le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et les réponses au stress cellulaire. Les complexes associés à SAP18 interfèrent également avec la maturation des ARN et les voies de signalisation apoptotiques, ce qui reflète des rôles étendus dans le maintien de l’homéostasie nucléaire. Une régulation altérée des composants Sin3/HDAC, dont SAP18, a été associée à des états épigénétiques dérégulés observés dans le cancer et d’autres troubles caractérisés par un contrôle transcriptionnel aberrant.
SAP 18 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SAP18 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SAP18. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SAP18. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SAP18.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.