SAMD4A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406449

Descripción general

SAMD4A (dominio motivo alfa estéril que contiene 4A) es una proteína reguladora que se une al ARN e interviene en el control posranscripcional de la expresión génica mediante el reconocimiento de motivos específicos en los ARNm diana. Participa en la estabilidad, la localización y la represión de la traducción del ARNm, vinculando la actividad de SAMD4A con transiciones del estado celular y programas de adaptación al estrés que remodelan el proteoma. A través de estas funciones, SAMD4A puede influir en vías que regulan la proliferación, la diferenciación y las salidas de señalización relacionadas con el sistema inmunitario al modular la traducción de componentes de dichas vías. La alteración de la regulación de SAMD4A se ha estudiado en el contexto de programas de expresión génica asociados al cáncer y fenotipos inflamatorios en los que un metabolismo del ARN desregulado contribuye a comportamientos celulares relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SAMD4A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SAMD4A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SAMD4A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SAMD4A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SAMD4A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SAMD4A para la investigación de la señalización de SAMD4A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SAMD4A críticos para la función de SAMD4A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SAMD4A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SAMD4A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SAMD4A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SAMD4A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SAMD4A (h) y el plásmido HDR SAMD4A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SAMD4A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SAMD4A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.