Plásmido Doble Nickase (h) Sall4: sc-401033-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sall4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sall4 (h) y el plásmido de doble nickasa Sall4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SALL4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sall4 Anticuerpo (G-3): sc-166033
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sall4 | sc-401033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sall4 | sc-401033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SALL4 codifica Sall4, un factor de transcripción con dedos de zinc tipo C2H2 que ayuda a mantener la pluripotencia y regula programas de expresión génica del desarrollo temprano, incluidas redes que controlan la autorrenovación, el compromiso de linaje y el estado de la cromatina. Sall4 coordina los circuitos transcripcionales con factores como OCT4 y NANOG y se relaciona con reguladores epigenéticos para moldear la actividad de potenciadores y promotores durante la embriogénesis. En contextos somáticos, la expresión desregulada de SALL4 se asocia con diferenciación alterada y señales proliferativas, y se ha descrito en múltiples neoplasias malignas, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar la reconfiguración transcripcional oncogénica. La perturbación genética de SALL4 permite investigaciones mecanísticas de la biología de las células madre, las transiciones de destino celular y las redes reguladoras génicas impulsadas por factores de transcripción.
Sall4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SALL4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SALL4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SALL4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SALL4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.