Plasmide Double Nickase (h) ROR1: sc-401841-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ROR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ROR1 Double Nickase (h) et le plasmide ROR1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ROR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ROR1 Antibody (60-D): sc-130386
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ROR1 | sc-401841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ROR1 | sc-401841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ROR1 (receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1) code un récepteur transmembranaire à passage unique de la famille ROR, qui participe à la signalisation Wnt non canonique, notamment aux réponses dépendantes d’un ligand à WNT5A. ROR1 module la polarité cellulaire, la migration, le remodelage du cytosquelette et les programmes de survie via des interactions entre voies de signalisation impliquant les GTPases de la famille Rho, PI3K/AKT, MAPK et des nœuds de signalisation associés à NF-κB. Bien que son expression soit étroitement régulée au cours du développement, une expression et une signalisation aberrantes de ROR1 ont été associées à des états de différenciation altérés et à des phénotypes invasifs dans de multiples contextes pathologiques. Ces propriétés font de ROR1 une cible utile pour étudier l’architecture de la voie Wnt, la signalisation proximale au récepteur et les mécanismes qui gouvernent la motilité et la plasticité des états cellulaires.
ROR1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ROR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ROR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ROR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ROR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.