RINT-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407428

Descripción general

RINT1 codifica RINT-1, una proteína de tipo *coiled-coil* que contribuye a la homeostasis del aparato de Golgi y del retículo endoplásmico (RE) al facilitar el anclaje de vesículas y el tráfico de membranas entre estos compartimentos. RINT-1 participa en el mantenimiento de una organización adecuada de la vía secretora y en la coordinación de las respuestas celulares al estrés proteotóxico y al estrés asociado a la replicación, procesos que se relacionan con la estabilidad del genoma y el control del ciclo celular. La alteración del tráfico dependiente de RINT1 puede perturbar el procesamiento de proteínas y la integridad de los orgánulos, dando lugar a cambios en la señalización y en la adaptación al estrés. Estudios genéticos y funcionales han vinculado RINT1 con la susceptibilidad al cáncer y otros trastornos proliferativos, lo que lo hace relevante para investigar los mecanismos que acoplan el transporte intracelular con las respuestas al estrés oncogénico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RINT-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RINT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RINT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RINT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RINT-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RINT1 para la investigación de la señalización de RINT-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RINT1 críticos para la función de RINT-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RINT1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RINT-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RINT-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RINT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RINT-1 (h) y el plásmido HDR RINT-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RINT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RINT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.