Ribosomal Protein S18 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406494

Descripción general

RPS18 codifica la proteína ribosomal S18, un componente esencial de la subunidad ribosomal pequeña 40S que ayuda a estabilizar la estructura del ARNr y favorece una decodificación precisa durante el inicio y la elongación de la traducción. Como parte de la biogénesis ribosomal y de la síntesis global de proteínas, RPS18 contribuye a la proteostasis, el crecimiento celular y las vías de control translacional adaptativas al estrés. La alteración de la expresión o la perturbación de proteínas ribosomales puede influir en la señalización de estrés nucleolar y en puntos de control dependientes de p53, vinculando la disfunción ribosomal con cambios en los programas de proliferación y apoptosis. La biogénesis ribosomal y la traducción desreguladas son características recurrentes del cáncer y de las ribosomopatías, lo que convierte a RPS18 en un nodo útil para estudiar cómo la maquinaria translacional central se relaciona con estados celulares asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S18 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPS18 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPS18 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPS18 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein S18.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPS18 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein S18, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPS18 críticos para la función de Ribosomal Protein S18
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPS18 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein S18 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein S18 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPS18. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein S18 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein S18 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPS18 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPS18 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.