Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L39: sc-410990-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L39 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ribosomal Protein L39 Double Nickase (h) et le plasmide Ribosomal Protein L39 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RPL39. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L39 | sc-410990-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ribosomal Protein L39 | sc-410990-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **RPL39** code la protéine ribosomique **L39**, un petit composant basique de la grande sous-unité ribosomique **60S** qui contribue à l’assemblage des ribosomes et à la traduction stable des ARNm. En tant qu’élément de la machinerie traductionnelle centrale, RPL39 influence la capacité de synthèse protéique, le contrôle qualité co-traductionnel et des programmes cellulaires plus larges liés à la croissance, aux réponses au stress et à la protéostasie. La perturbation des protéines ribosomiques peut déclencher un stress nucléolaire et des modifications de signalisation en aval, notamment des points de contrôle dépendants de **p53**, et peut modifier la sélectivité de la traduction pour certains transcrits. La dérégulation de la biogenèse et de la fonction ribosomiques est largement impliquée dans les ribosomopathies et la reprogrammation traductionnelle associée au cancer, ce qui fait de RPL39 une cible pertinente pour étudier comment une composition ribosomique altérée influence l’état cellulaire et des phénotypes liés aux maladies.
Ribosomal Protein L39 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RPL39 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RPL39. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RPL39. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RPL39.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.