Partículas Lentivirales de Activación (h) Ribosomal Protein L22L1: sc-402323-LAC

RPL22L1 codifica la proteína ribosomal L22L1, un componente ribosomal citoplasmático que respalda la función de la subunidad grande 60S y contribuye a una traducción eficiente del ARNm. Como parte de los procesos centrales de biogénesis del ribosoma y control de la traducción, RPL22L1 influye en la proteostasis y en programas de crecimiento celular sensibles a cambios en la composición ribosomal. Las alteraciones en la dosis de proteínas ribosomales pueden afectar la regulación del ciclo celular, las respuestas al estrés y la expresión génica específica de linaje mediante cambios en la traducción de ARNm estructurados o reguladores. En investigación biomédica, RPL22L1 se estudia en el contexto de la especialización ribosomal y de vías de síntesis proteica desreguladas que con frecuencia se asocian a fenotipos oncogénicos y del desarrollo.

Las partículas de activación lentiviral Ribosomal Protein L22L1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de RPL22L1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Ribosomal Protein L22L1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción RPL22L1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Ribosomal Protein L22L1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo RPL22L1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.