Ribosomal Protein L22L1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402323

Descripción general

RPL22L1 codifica la proteína ribosomal L22L1, un componente de la subunidad ribosomal grande 60S que contribuye a la biogénesis del ribosoma y a una traducción eficiente del ARNm. A través de su participación en el control de la traducción, RPL22L1 puede influir en la proteostasis, la progresión del ciclo celular y los programas de adaptación al estrés que dependen del reclutamiento selectivo de ARNm y de la función ribosomal. La regulación alterada de proteínas ribosomales y de factores de ensamblaje del ribosoma se asocia con frecuencia a programas de crecimiento desregulados y a vías de mantenimiento del genoma, lo que hace que RPL22L1 sea relevante para estudios sobre vulnerabilidades asociadas al ribosoma en estados proliferativos. Por ello, este gen es de interés para trabajos mecanísticos que conectan la capacidad de traducción con la homeostasis celular y fenotipos asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L22L1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RPL22L1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RPL22L1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RPL22L1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ribosomal Protein L22L1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RPL22L1 para la investigación de la señalización de Ribosomal Protein L22L1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RPL22L1 críticos para la función de Ribosomal Protein L22L1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RPL22L1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RPL22L1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ribosomal Protein L22L1 (h) y el plásmido HDR Ribosomal Protein L22L1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RPL22L1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RPL22L1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.