Plásmido Doble Nickase (h) Ribosomal Protein L10a: sc-417441-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ribosomal Protein L10a consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ribosomal Protein L10a (h) y el plásmido de doble nickasa Ribosomal Protein L10a (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RPL10A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ribosomal Protein L10a | sc-417441-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Ribosomal Protein L10a | sc-417441-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPL10A codifica la proteína ribosomal L10a, un componente central de la subunidad ribosomal grande 60S que favorece la biogénesis de los ribosomas y la elongación peptídica durante la traducción citosólica. Al contribuir al ensamblaje y la función de la maquinaria de traducción, RPL10A influye en la proteostasis y en programas de crecimiento celular que convergen con la señalización de respuesta al estrés y el control del ciclo celular. Las alteraciones en la dosis o la función de proteínas ribosomales pueden perturbar la traducción global y la selectiva por transcritos, vinculando la biología del ribosoma con mecanismos subyacentes a fenotipos del desarrollo y a la reprogramación traduccional asociada a tumores. Por ello, RPL10A se estudia con frecuencia en el contexto de ribosomopatías, especificación de linaje y regulación de la expresión génica dependiente de la traducción.
Ribosomal Protein L10a El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RPL10A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RPL10A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RPL10A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RPL10A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.