Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS7 (m): sc-423946
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RGS7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RGS7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS7 (m) | sc-423946 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Rgs7 code le régulateur de la signalisation des protéines G 7 (RGS7), une GAP qui accélère l’hydrolyse du GTP médiée par Gαi/o afin de mettre fin à la signalisation des GPCR. RGS7 joue un rôle majeur dans le système nerveux au sein de complexes avec Gβ5 et R7BP, modulant la régulation, induite par les récepteurs, de la signalisation adénylate cyclase/AMPc, de l’activité des canaux ioniques et de la transmission synaptique. En limitant l’amplitude et la durée des réponses aux neurotransmetteurs, RGS7 influence l’excitabilité neuronale, la plasticité et les sorties de signalisation au niveau des circuits. La dérégulation de voies associées à RGS7 a été reliée à des phénotypes neurocomportementaux et neuropsychiatriques dans des études génétiques et fonctionnelles, ce qui souligne sa pertinence pour la recherche mécanistique en neurosciences.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS7 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Rgs7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Rgs7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Rgs7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RGS7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Rgs7 pour l'étude de la signalisation de RGS7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Rgs7 essentiels à la fonction de RGS7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Rgs7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RGS7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le RGS7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Rgs7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RGS7 plasmide HDR (m) et le RGS7 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Rgs7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Rgs7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.