Plasmide Double Nickase (h) REPS1: sc-409347-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) REPS1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide REPS1 Double Nickase (h) et le plasmide REPS1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant REPS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) REPS1 | sc-409347-NIC | 20 µg | $410.00 |
REPS1 (protéine 1 contenant un domaine Eps associée à RALBP1) code une protéine adaptatrice impliquée dans l’endocytose médiée par la clathrine et le trafic des récepteurs via des interactions avec RalBP1/RLIP76 et des facteurs accessoires de l’endocytose. En couplant la signalisation des petites GTPases à la formation de vésicules et à l’internalisation des cargos, REPS1 peut influencer des voies en aval qui dépendent d’une disponibilité régulée des récepteurs, notamment la signalisation des facteurs de croissance et des réponses au stress. Les processus associés à REPS1 recoupent la dynamique du cytosquelette et le remodelage membranaire, ce qui le relie à la migration cellulaire, à l’adhérence et à l’atténuation des signaux. La dérégulation des adaptateurs endocytiques et des composants de la voie Ral a été associée à une signalisation proliférative altérée et à des phénotypes invasifs en biologie du cancer, ce qui motive des études mécanistiques de la fonction de REPS1 dans des modèles cellulaires humains.
REPS1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus REPS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de REPS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de REPS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de REPS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.