Plasmide Double Nickase (h) RelB: sc-400371-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RelB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RelB Double Nickase (h) et le plasmide RelB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RELB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RelB Antibody (D-4): sc-48366
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RelB | sc-400371-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RelB | sc-400371-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RELB code pour RelB, un facteur de transcription de la famille NF-κB qui intervient principalement dans la voie NF-κB non canonique via l’hétérodimérisation avec p52 (NFKB2). RelB régule des programmes géniques impliqués dans la maturation des cellules dendritiques, l’organogenèse des tissus lymphoïdes, la survie des cellules B et la signalisation inflammatoire, en intégrant des signaux provenant de récepteurs tels que CD40, BAFFR et LTβR. En modulant l’expression de cytokines et de chimiokines ainsi que les voies de présentation de l’antigène, RelB influence les réponses immunitaires innées et adaptatives. Une activité dérégulée de RELB a été associée à des dysfonctionnements immunitaires et à des phénotypes inflammatoires, et les altérations de l’équilibre des voies NF-κB sont fréquemment étudiées dans le contexte de la signalisation du microenvironnement tumoral et de la biologie des hémopathies malignes.
RelB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RELB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RELB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RELB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RELB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.