RBM24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-410387

Übersicht

RBM24 (RNA-Bindungsmotiv-Protein 24) ist ein in Muskelgewebe besonders stark exprimiertes RNA-bindendes Protein, das die posttranskriptionelle Genexpression reguliert, indem es alternatives Spleißen, mRNA-Stabilität und die subzelluläre Lokalisation von Transkripten steuert. Es trägt zur myogenen Differenzierung und zur Organisation der Sarkomere bei, indem es muskelspezifische RNA-Programme koordiniert und mit der Spleiß- und Translationsmaschinerie zusammenwirkt. Die Aktivität von RBM24 wird mit der Entwicklung von Herz- und Skelettmuskel in Verbindung gebracht, und eine veränderte RBM24-abhängige RNA-Prozessierung ist mit kardiomyopathieassoziierten Phänotypen sowie dysregulierten Differenzierungszuständen assoziiert. Da RBM24 die Isoformwahl und das Schicksal von RNA beeinflusst, wird es häufig in Signalwegen untersucht, die die Zytoskelettassemblierung, die Erregungs-Kontraktions-Kopplung und stressabhängiges Remodeling steuern.

Das RBM24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RBM24-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RBM24-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RBM24 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RBM24-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RBM24-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RBM24-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RBM24-Exone abzielen, die für die RBM24-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RBM24-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RBM24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RBM24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RBM24-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RBM24 HDR-Plasmid (h) und RBM24 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RBM24-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RBM24-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.