Plásmido Doble Nickase (h) RBM10: sc-418527-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RBM10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RBM10 (h) y el plásmido de doble nickasa RBM10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RBM10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RBM10 Anticuerpo (H-4): sc-515548
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RBM10 | sc-418527-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RBM10 | sc-418527-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM10 (proteína 10 con motivo de unión a ARN) es un factor de unión a ARN predominantemente nuclear que regula el empalme (splicing) del pre-ARNm, la selección alternativa de exones y el procesamiento del ARN mediante interacciones con componentes del espliceosoma y con motivos de ARN específicos de secuencia. Al moldear la producción de isoformas de transcritos, RBM10 influye en programas de expresión génica vinculados al control del ciclo celular, la apoptosis y la diferenciación, y se ha implicado en redes relevantes para la señalización, como decisiones de empalme asociadas a Notch. La actividad o expresión desregulada de RBM10 se asocia con paisajes de empalme alterados observados en múltiples contextos de cáncer, donde el cambio de isoformas puede afectar vías de proliferación y de respuesta al estrés. Estas propiedades hacen de RBM10 un objetivo útil para estudios mecanísticos de la regulación del splicing y la remodelación del transcriptoma en células humanas.
RBM10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RBM10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RBM10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RBM10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RBM10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.