Plasmide Double Nickase (h) Ran BP-3: sc-405001-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ran BP-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ran BP-3 Double Nickase (h) et le plasmide Ran BP-3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RANBP3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ran BP-3 Antibody (D-2): sc-377253
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ran BP-3 | sc-405001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ran BP-3 | sc-405001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RANBP3 code la protéine de liaison à Ran 3 (Ran BP-3), un cofacteur de l’export nucléaire qui participe au transport nucléocytoplasmique dépendant de RanGTP. Ran BP-3 interagit avec des récepteurs d’export afin de soutenir l’export médié par CRM1/XPO1 et contribue au maintien d’une distribution noyau–cytoplasme appropriée des protéines régulatrices et des ARN. Par son rôle dans la dynamique du transport, RANBP3 s’inscrit à l’interface de voies qui contrôlent les programmes transcriptionnels, la progression du cycle cellulaire et les réponses au stress. Une dérégulation de la machinerie d’export nucléaire, y compris des facteurs modulant Ran et la fonction des exportines, est impliquée dans des altérations de la signalisation et des phénotypes d’instabilité génomique pertinents pour le cancer ainsi que pour d’autres contextes prolifératifs ou neurodégénératifs.
Ran BP-3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RANBP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RANBP3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RANBP3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RANBP3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.