Raf-1慢病毒激活颗粒(h): sc-400202-LAC
- 针对种属：human
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- Raf-1 慢病毒激活颗粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- Raf-1慢病毒激活颗粒(h)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 Raf-1 慢病毒激活质粒 (h) 和 Raf-1 慢病毒激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 靶向 RAF1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：Raf-1 Antibody (E-10): sc-7267，通过WB、IF或IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Raf-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400202-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 RAF1 基因编码 Raf-1，这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，作为 MAPK 通路的核心节点，将被激活的 RAS 家族 GTP 酶与 MEK1/2 和 ERK1/2 信号传导连接起来。Raf-1 整合来自受体酪氨酸激酶以及多种支架蛋白的信号线索，从而调控增殖、分化、生存与应激反应，同时还参与细胞骨架动力学和线粒体信号传递。RAF1 活性失调会导致在多种与癌症相关的信号背景中观察到的 ERK 输出异常；此外，它也通过通路过度激活和发育信号改变而与 RAS 病（RASopathy）表型相关。因此，RAF1 是研究通路反馈、信号幅度/持续时间控制，以及与 PI3K/AKT 和凋亡调控因子之间串扰的一个重要机制切入点。
Raf-1 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RAF1 表达。
Raf-1 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在RAF1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Raf-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 RAF1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。