Rab 7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400465-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAB7A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 7 Anticorpo (B-3): sc-376362
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400465-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab 7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400465-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAB7A codifica a pequena GTPase Rab7, um regulador central da maturação de endossomos tardios, do tráfego endossomo–lisossomo e da fusão autófago–lisossomo. Ao coordenar o recrutamento de efetores como o RILP e o complexo de ancoragem HOPS, a Rab7 sustenta vias de degradação lisossomal, a redução (downregulation) de receptores e a remodelação de membranas no sistema endolisossomal. A atividade da Rab7 cruza-se com a deteção de nutrientes e com respostas ao stresse, incluindo mitofagia e o fluxo autofágico global, moldando a proteostase e o controlo de qualidade dos organelos. A desregulação do tráfego mediado por RAB7A está associada a fenótipos neurodegenerativos e a neuropatias, sendo também relevante na biologia das infeções, em que patógenos manipulam o transporte endolisossomal.
Rab 7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAB7A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAB7A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAB7A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAB7A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.