Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 14 (m): sc-427035
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Rab 14 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Rab 14, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rab 14 Antibody (D-5): sc-271401
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 14 (m) | sc-427035 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Rab14 code Rab 14, une petite GTPase qui régule le trafic vésiculaire entre les endosomes, l’appareil de Golgi et la membrane plasmique, en coordonnant le tri des cargos et le recyclage membranaire. Rab14 participe au recyclage endocytique et aux processus de transport sécrétoire qui modulent la disponibilité des récepteurs, la localisation des transporteurs de nutriments et la dynamique des membranes. Par ses rôles dans la maturation des endosomes et l’organisation des nœuds de trafic, Rab14 influence des voies liées à la polarité cellulaire, à la cytokinèse et à la régulation métabolique. Dans des systèmes expérimentaux, un trafic dépendant de Rab14 dérégulé a été associé à des phénotypes pertinents pour la signalisation oncogénique, le transport sensible à l’insuline et le remodelage des vacuoles contenant des agents pathogènes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 14 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Rab14 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Rab14, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Rab14 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Rab 14.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Rab14 pour l'étude de la signalisation de Rab 14, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Rab14 essentiels à la fonction de Rab 14
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Rab14 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Rab 14 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Rab 14 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Rab14. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Rab 14 plasmide HDR (m) et le Rab 14 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Rab14 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Rab14 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.