PRDM5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427796

Descripción general

Prdm5 codifica PRDM5, un regulador transcripcional con dominio PR/SET que modula programas de expresión génica implicados en la diferenciación, la organización de la matriz extracelular y el control del ciclo celular. PRDM5 se ha vinculado a la regulación epigenética mediante interacciones con la maquinaria modificadora de la cromatina, influyendo en la represión o activación transcripcional en loci diana. En sistemas murinos, la actividad de Prdm5 se ha asociado con procesos del desarrollo relacionados con el tejido conectivo y el hueso, lo que refleja su papel en la regulación de redes génicas de matriz y estructura. La alteración de la función de PRDM5 se ha estudiado en el contexto de un control del crecimiento desregulado y de desequilibrios epigenéticos relevantes para la biología tumoral y para estados transcripcionales similares a los fibróticos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRDM5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prdm5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prdm5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prdm5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRDM5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prdm5 para la investigación de la señalización de PRDM5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prdm5 críticos para la función de PRDM5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prdm5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRDM5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PRDM5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prdm5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRDM5 (m) y el plásmido HDR PRDM5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prdm5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prdm5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.