Plasmide Double Nickase (h) PPP2R3A: sc-402433-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PPP2R3A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PPP2R3A Double Nickase (h) et le plasmide PPP2R3A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PPP2R3A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PPP2R3A | sc-402433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PPP2R3A | sc-402433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP2R3A code PR130, une sous-unité régulatrice B″ de la protéine phosphatase 2A (PP2A) qui contribue à orienter l’assemblage de l’holoenzyme PP2A, sa localisation subcellulaire et la sélection de ses substrats. Par la déphosphorylation médiée par PP2A, PPP2R3A influence le contrôle, dépendant de la phosphorylation, de la progression du cycle cellulaire, de l’organisation du cytosquelette et des cascades de transduction du signal qui intègrent des signaux pilotés par des kinases. Une régulation altérée de PP2A est largement associée à des perturbations des voies de signalisation de croissance et de réponse au stress, et des modifications de l’expression ou de la fonction de PPP2R3A ont été étudiées dans le contexte du remaniement de voies oncogéniques et d’autres mécanismes pathologiques centrés sur la phosphorylation. Par conséquent, PPP2R3A est fréquemment étudié afin d’analyser comment la spécificité de PP2A façonne les sorties des voies en aval et les phénotypes cellulaires.
PPP2R3A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PPP2R3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PPP2R3A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PPP2R3A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PPP2R3A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.