Plasmide Double Nickase (h) podoplanin: sc-401332-NIC

Le gène humain **PDPN** code la podoplanine, une glycoprotéine transmembranaire de type mucine qui module la forme cellulaire, l’adhésion et la motilité via des interactions avec les protéines ERM et le remodelage du cytosquelette d’actine. La podoplanine agit également comme ligand clé de **CLEC-2**, reliant les cellules exprimant PDPN à l’activation plaquettaire et contribuant aux processus de signalisation associés au système lymphatique et vasculaire. L’expression de **PDPN** est enrichie dans l’endothélium lymphatique et les compartiments stromaux, où elle participe à l’organisation tissulaire, à des programmes de type épithélio-mésenchymateux et à la dynamique de la matrice extracellulaire. Une dérégulation de la podoplanine a été associée au stroma tumoral, à des phénotypes invasifs et au remodelage inflammatoire, faisant de **PDPN** une cible utile pour des études mécanistiques de la signalisation du microenvironnement.

podoplanin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PDPN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PDPN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PDPN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PDPN.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.