plexin-B2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-431226-LAC

Das murine Plxnb2 kodiert Plexin‑B2, einen transmembranen Rezeptor für Semaphorine der Klasse 4, der über Signalwege der Rho‑Familie von GTPasen Axonleitung, Zellmigration und Gewebemorphogenese koordiniert. Plexin‑B2 integriert Semaphorin‑Signale mit Zytoskelett‑Remodeling und Adhäsionsdynamik und beeinflusst dabei Signalwege, die in der Reorganisation von Aktin, der Regulation kleiner GTPasen und Rezeptor‑Crosstalk in sich entwickelnden und adulten Geweben zusammenlaufen. Im Nervensystem und in anderen Organkontexten wurde PLXNB2‑abhängige Signalübertragung mit der Regulation neuronaler Positionierung, Verzweigung sowie barriereassoziierter Zellverhaltensweisen in Verbindung gebracht, was es für Studien zu neuroentwicklungsbiologischen Mechanismen und fehlregulierten Motilitätsprogrammen relevant macht. Seine Signalweg‑Verknüpfungen unterstützen zudem die Untersuchung von Plexin-/Semaphorin‑Signalmodulen, die in krankheitsrelevanten Modellen mit invasiven Phänotypen und Interaktionen mit dem Mikromilieu assoziiert sind.

plexin-B2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Plxnb2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

plexin-B2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Plxnb2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen plexin-B2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Plxnb2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.