PLAC8 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405093-LAC

PLAC8 (placenta-associated 8), auch bekannt als Onzin, kodiert ein kleines cysteinreiches Protein, das an der Regulation der Zelldifferenzierung, der epithelialen Homöostase und der Stressantwort-Signalgebung beteiligt ist. In humanen Zellen wird PLAC8 mit der Modulation von Proliferations- und Überlebensprogrammen in Verbindung gebracht, darunter Signalwege, die mit den Outputs der MAPK- und PI3K/AKT-Signalgebung assoziiert sind, sowie Prozesse, die mit der Organisation des Zytoskeletts und der Membrandynamik zusammenhängen. Eine veränderte PLAC8-Expression wurde in mehreren Tumorkontexten und Entzündungszuständen beschrieben, wo sie mit Änderungen in Invasion, metabolischer Anpassung und immunassoziierten Phänotypen korreliert. Diese Eigenschaften machen PLAC8 zu einem nützlichen Ziel, um Transkriptionsnetzwerke zu untersuchen, die Linienentscheidungen und mikroumgebungsresponsive Zellverhaltensweisen steuern.

PLAC8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PLAC8-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PLAC8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PLAC8-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PLAC8-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PLAC8-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.