Plásmido Doble Nickase (m) PLAC1: sc-425008-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PLAC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PLAC1 (m) y el plásmido de doble nickasa PLAC1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Plac1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PLAC1 Anticuerpo (G-1): sc-365919
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PLAC1 | sc-425008-NIC | 20 µg | $410.00 |
Plac1 codifica PLAC1, una proteína asociada a membrana enriquecida en la placenta, implicada en la diferenciación del trofoblasto, la morfogénesis placentaria y la regulación de la biología de la interfaz feto‑materna en el ratón. La expresión de PLAC1 se vincula a procesos como la adhesión celular, la migración y la formación de una barrera de tipo epitelial que sustentan el desarrollo normal de la placenta y el intercambio de nutrientes. La desregulación de PLAC1 se ha asociado con un crecimiento placentario anómalo y fenotipos reproductivos, lo que convierte a Plac1 en un locus útil para diseccionar redes génicas que gobiernan el desarrollo extraembrionario y la señalización endocrina. Además, PLAC1 se estudia con frecuencia como un antígeno oncofetal en biología del cáncer, lo que respalda la investigación mecanística sobre la reprogramación del desarrollo y los programas de expresión génica asociados a tumores, sin implicar utilidad clínica.
PLAC1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Plac1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Plac1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Plac1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Plac1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.