Plasmide Double Nickase (m) PLAC1: sc-425008-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PLAC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PLAC1 Double Nickase (m) et le plasmide PLAC1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Plac1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PLAC1 Antibody (G-1): sc-365919
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PLAC1 | sc-425008-NIC | 20 µg | $410.00 |
Plac1 code pour PLAC1, une protéine membranaire associée, enrichie dans le placenta, impliquée chez la souris dans la différenciation des trophoblastes, la morphogenèse placentaire et la régulation de la biologie de l’interface fœto-maternelle. L’expression de PLAC1 est liée à des processus tels que l’adhérence cellulaire, la migration et la formation d’une barrière de type épithélial, qui soutiennent le développement normal du placenta et les échanges de nutriments. Une dérégulation de PLAC1 a été associée à une croissance placentaire anormale et à des phénotypes reproductifs, faisant de Plac1 un locus utile pour disséquer les réseaux de gènes qui gouvernent le développement extra-embryonnaire et la signalisation endocrinienne. Par ailleurs, PLAC1 est fréquemment étudié comme antigène oncofœtal en biologie du cancer, ce qui soutient des recherches mécanistiques sur la reprogrammation développementale et les programmes d’expression génique associés aux tumeurs, sans pour autant impliquer une utilité clinique.
PLAC1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Plac1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Plac1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Plac1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Plac1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.