Plasmide Double Nickase (h) PLA2R: sc-411636-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PLA2R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PLA2R Double Nickase (h) et le plasmide PLA2R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PLA2R1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PLA2R | sc-411636-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PLA2R | sc-411636-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLA2R1 code le récepteur M de la phospholipase A2 (PLA2R), un membre de la famille des lectines de type C à passage transmembranaire unique, qui se lie aux phospholipases A2 sécrétées et à d’autres ligands extracellulaires afin de réguler l’endocytose médiée par le récepteur, la clairance des ligands et la signalisation en aval. Par l’intermédiaire de ses domaines extracellulaires de reconnaissance, PLA2R influence les voies des médiateurs lipidiques inflammatoires ainsi que des réponses cellulaires liées au remodelage membranaire et au stress oxydatif. L’expression de PLA2R1 et le renouvellement du récepteur ont été associés à des lésions tissulaires d’origine immunitaire et à une inflammation spécifique d’organe, ce qui en fait un point d’entrée moléculaire pertinent pour étudier la dynamique récepteur–ligand dans des contextes pathologiques. En biologie rénale, PLA2R est une cible antigénique majeure dans certaines glomérulopathies auto-immunes, rendant la perturbation de PLA2R1 utile pour des études mécanistiques sur la présentation de l’antigène, la liaison des anticorps et les réponses de stress cellulaire.
PLA2R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PLA2R1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PLA2R1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PLA2R1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PLA2R1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.