PLA2R CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422280

Übersicht

Pla2r1 kodiert PLA2R, einen C‑Typ‑Lektinrezeptor der Klasse I mit Transmembrandomäne, der sekretierte Phospholipase‑A2‑Enzyme bindet und zur extrazellulären Ligandenerfassung sowie zur rezeptorvermittelten Endozytose beiträgt. Durch die Regulation der Ligandeninternalisierung und membranassoziierter Signalreize beeinflusst PLA2R in einem kontextabhängigen manner die Verfügbarkeit von Lipidmediatoren, den Entzündungsgrundtonus und Zell‑Matrix‑Interaktionen. In Mausgeweben wurde die Pla2r1‑Expression mit Immun‑ und Stromabiologie in Verbindung gebracht, mit berichteter Relevanz für Entzündungsprozesse und fibrotisches Remodeling. Eine veränderte Aktivität des PLA2R‑Signalwegs wird häufig in Modellen von Organschädigungen und immunvermittelten Gewebereaktionen untersucht, bei denen die Rezeptor‑Ligand‑Dynamik nachgeschaltete transkriptionelle und metabolische Programme prägen kann.

Das PLA2R CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Pla2r1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Pla2r1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Pla2r1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PLA2R-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Pla2r1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PLA2R-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Pla2r1-Exone abzielen, die für die PLA2R-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Pla2r1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PLA2R CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PLA2R CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Pla2r1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PLA2R HDR-Plasmid (m) und PLA2R HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Pla2r1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Pla2r1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.