Peptide YY CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403446

Übersicht

PYY kodiert Peptid YY, ein im Darm gebildetes endokrines Peptid, das vor allem von enteroendokrinen L‑Zellen als Reaktion auf die Nahrungsaufnahme sezerniert und in bioaktive Formen prozessiert wird, die über Mitglieder der Neuropeptid‑Y‑Rezeptorfamilie signalisieren, insbesondere über Y2. Peptid YY moduliert die gastrointestinale Motilität und Sekretion sowie Sättigungssignale innerhalb von Schaltkreisen der Darm‑Hirn‑Achse und integriert enteroendokrine Signale mit hypothalamischen und vagalen Bahnen. Über diese rezeptorvermittelten GPCR‑Prozesse trägt PYY zur Energiehomöostase und zur metabolischen Regulation bei; veränderte Expressionsmuster wurden mit Adipositas, Typ‑2‑Diabetes und gastrointestinalen Erkrankungen in Verbindung gebracht. PYY wird außerdem als Marker in Studien zur enteroendokrinen Differenzierung und zur Biologie des intestinalen Epithels verwendet.

Das Peptide YY CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PYY-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PYY-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PYY nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Peptide YY-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PYY-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Peptide YY-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PYY-Exone abzielen, die für die Peptide YY-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PYY-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Peptide YY CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Peptide YY CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PYY-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Peptide YY HDR-Plasmid (h) und Peptide YY HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PYY-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PYY-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.