PDGF-C Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401977

Descripción general

PDGFC codifica el factor de crecimiento derivado de plaquetas C (PDGF-C), un factor de crecimiento secretado que se activa mediante proteólisis y que señala principalmente a través de complejos de receptores de PDGF para regular la proliferación y la migración de células mesenquimales, así como la remodelación de la matriz extracelular. PDGF-C contribuye a la comunicación paracrina entre los compartimentos estromal y epitelial y activa vías posteriores como PI3K–AKT y MAPK/ERK, que coordinan el desarrollo y la reparación tisular. La desregulación de la señalización de PDGF-C se asocia con angiogénesis aberrante, remodelación relacionada con fibrosis e interacciones tumor–estroma en múltiples contextos patológicos. Por ello, PDGFC se estudia con frecuencia en modelos de biología vascular, reparación de heridas, microambientes inflamatorios y diafonía de señalización oncogénica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PDGF-C (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PDGFC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PDGFC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PDGFC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PDGF-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PDGFC para la investigación de la señalización de PDGF-C, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PDGFC críticos para la función de PDGF-C
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PDGFC para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PDGF-C CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PDGF-C CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PDGFC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PDGF-C (h) y el plásmido HDR PDGF-C (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PDGFC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PDGFC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.