Plásmido Doble Nickase (h) PCTAIRE-1: sc-405470-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PCTAIRE-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PCTAIRE-1 (h) y el plásmido de doble nickasa PCTAIRE-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDK16. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PCTAIRE-1 Anticuerpo (G6.1): sc-53410
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PCTAIRE-1 | sc-405470-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PCTAIRE-1 | sc-405470-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK16 codifica la quinasa de serina/treonina PCTAIRE-1, un miembro de la familia CDK que se asocia con ciclinas y cofactores reguladores para controlar programas de fosforilación vinculados a la progresión del ciclo celular, el tráfico vesicular, la remodelación del citoesqueleto y el desarrollo neuronal. La actividad de PCTAIRE-1 se ha relacionado con la proteostasis y procesos asociados a la autofagia, incluida la modulación de vías de recambio proteico que influyen en las respuestas al estrés celular. En células humanas, se han descrito alteraciones en la expresión de CDK16 o en su señalización quinasa en múltiples contextos relevantes para enfermedades, donde podría afectar fenotipos de proliferación, migración y diferenciación. Estas propiedades hacen de CDK16 un nodo útil para investigar redes de señalización reguladas por quinasas y la intercomunicación entre vías en estudios mecanísticos.
PCTAIRE-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDK16 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDK16. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDK16. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDK16 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.