PBEF慢病毒激活颗粒(m): sc-425569-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- PBEF 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- PBEF慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 PBEF 慢病毒激活质粒 (m) 和 PBEF 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Nampt 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：PBEF Antibody (E-3): sc-393444，通过WB、IF或IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PBEF慢病毒激活颗粒(m) | sc-425569-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Nampt（亦称 PBEF/visfatin）编码烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT），这是 NAD 补救合成通路的限速酶。该通路将烟酰胺转化为 NMN，从而维持细胞内 NAD 储备。通过调控 NAD 的可用性，NAMPT 影响依赖 sirtuin 和 PARP 的一系列程序，进而作用于线粒体代谢、氧化应激反应、DNA 修复以及炎症信号传导。NAMPT 活性将营养感知与转录及表观遗传调控相联系，影响免疫细胞激活、脂肪组织生物学以及细胞应激适应等过程。NAMPT/NAD 代谢失衡与代谢功能障碍、神经炎症状态以及肿瘤细胞生物能量代谢重编程相关，因此在小鼠模型的机制研究中是一个有价值的研究节点。
PBEF 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Nampt 表达。
PBEF 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Nampt转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PBEF表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Nampt 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。