Plásmido Doble Nickase (h2) Pax-2: sc-402171-NIC-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h2)Pax-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Pax-2 (h2) y el plásmido de doble nickasa Pax-2 (h22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PAX2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Pax-2 Anticuerpo (60-P): sc-130387
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h2) Pax-2 | sc-402171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El PAX2 humano codifica el factor de transcripción de caja pareada Pax-2, un regulador de unión al ADN esencial para el patrón embrionario y la especificación de linajes, en particular durante el desarrollo del riñón, el tracto urogenital y el sistema nervioso central. Pax-2 controla programas transcripcionales dependientes del contexto al unirse a sitios de reconocimiento de la caja pareada y coordinarse con la cromatina y complejos corre reguladores para influir en la diferenciación epitelial, la morfogénesis y la proliferación durante la organogénesis. La expresión desregulada de PAX2 o sus alteraciones genéticas se asocian con anomalías congénitas del riñón y del tracto urinario y también se han vinculado con estados transcripcionales oncogénicos en diversos contextos tumorales, lo que lo hace relevante para el estudio de redes reguladoras génicas del desarrollo y de mecanismos de enfermedad. Los reactivos de edición génica de PAX2 permiten realizar knockouts, knock-ins o la perturbación de elementos reguladores de manera dirigida para investigar vías dependientes de Pax-2, cartografiar dianas aguas abajo y modelar fenotipos del desarrollo y asociados a la transformación en células humanas.
Pax-2 El plásmido de doble nicasa (h2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PAX2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PAX2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PAX2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PAX2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.