PARP-9 Double Nickase Plasmid (m): sc-429785-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PARP-9 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PARP-9 Double-Nickase-Plasmid (m) und PARP-9 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Parp9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PARP-9 Double Nickase Plasmid (m) | sc-429785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PARP-9 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-429785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Parp9 kodiert PARP-9, ein Mitglied der Familie der Mono-ADP-Ribosyltransferasen, das überwiegend als regulatorisches Gerüstprotein in der interferonstimulierten Signalübertragung fungiert. PARP-9 bildet mit DTX3L einen Komplex und fördert ubiquitinabhängige Signalwege, die antivirale Antworten, Antigenpräsentation und Transkriptionsprogramme nachgeschaltet an JAK–STAT sowie an Rezeptoren der angeborenen Immunität prägen. In Immun- und hämatopoetischen Zellen beeinflusst PARP-9 die Expression inflammatorischer Gene, die Polarisierung von Makrophagen und zelluläre Reaktionen auf durch Pathogene oder Zytokine ausgelösten Stress. Eine Fehlregulation von PARP9-Aktivität und -Expression wurde mit veränderter Immun-Signalgebung und Tumor‑Immun‑Interaktionen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für Studien zu Entzündung, Infektionsbiologie und krebsbezogener Immunregulation unterstreicht.
PARP-9 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Parp9-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Parp9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Parp9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Parp9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.