PARP-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406615

Descripción general

PARP4 codifica el miembro 4 de la familia de las poli(ADP-ribosa) polimerasas (PARP-4), una ADP-ribosiltransferasa vinculada a las respuestas celulares al daño del ADN y al estrés genotóxico. PARP-4 se asocia con la regulación de la dinámica de la cromatina y el mantenimiento de la integridad del genoma mediante señalización dependiente de la poli(ADP-ribosil)ación, que se integra con las vías de reparación del ADN y de puntos de control del ciclo celular. Se han descrito alteraciones en la actividad o la expresión de PARP4 en múltiples conjuntos de datos relacionados con el cáncer, lo que respalda su relevancia para estudiar la tolerancia al daño del ADN asociada a tumores y la adaptación al estrés. PARP-4 también se utiliza como un nodo mecanístico para investigar el diálogo cruzado entre la ADP-ribosilación, el estrés replicativo y la regulación transcripcional en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PARP-4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PARP4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PARP4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PARP4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PARP-4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PARP4 para la investigación de la señalización de PARP-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PARP4 críticos para la función de PARP-4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PARP4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PARP-4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PARP-4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PARP4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PARP-4 (h) y el plásmido HDR PARP-4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PARP4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PARP4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.