Plasmide Double Nickase (h) PARP-15: sc-414885-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PARP-15 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PARP-15 Double Nickase (h) et le plasmide PARP-15 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PARP15. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PARP-15 | sc-414885-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PARP-15 | sc-414885-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PARP15 code pour PARP-15, une mono-ADP-ribosyltransférase de la famille des poly(ADP-ribose) polymérases, qui régule la fonction des protéines par ADP-ribosylation. PARP-15 a été associée à la biologie de l’ARN et au contrôle post-transcriptionnel, notamment via la modulation de protéines liant l’ARN et de programmes d’expression génique répondant au stress. Par ces activités, elle peut influencer des processus cellulaires tels que la signalisation de l’immunité innée, la protéostasie et l’adaptation à des signaux génotoxiques ou inflammatoires. Une signalisation altérée de la famille PARP, y compris des voies associées à PARP15, est étudiée dans le contexte de réponses immunitaires dérégulées et d’états transcriptionnels et épigénétiques pertinents pour le cancer.
PARP-15 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PARP15 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PARP15. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PARP15. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PARP15.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.