Plasmide Double Nickase (h) PARP-14: sc-402812-NIC

PARP14 (PARP-14/ARTD8) est une mono-ADP-ribosyltransférase qui régule l’ADP-ribosylation des protéines afin de moduler des programmes transcriptionnels, la transduction du signal et des processus associés à la chromatine. Elle s’interface avec des voies induites par les cytokines, notamment la signalisation dépendante de STAT6, et peut influencer l’expression de gènes inflammatoires, les réponses au stress et la régulation du métabolisme via ses interactions avec des facteurs de transcription et des protéines liant l’ARN. L’activité de PARP-14 contribue à la différenciation et à la polarisation des cellules immunitaires, façonnant les réponses dans des contextes d’inflammation allergique et de défense de l’hôte. Une expression ou une fonction dérégulée de PARP14 a été associée à des altérations des réseaux de signalisation immunitaire et a été étudiée en biologie du cancer pour ses rôles dans la signalisation de survie et l’adaptation transcriptionnelle.

PARP-14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PARP14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PARP14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PARP14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PARP14.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.