Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PARD6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425492
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PARD6B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PARD6B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PARD6B Anticorpo (B-10): sc-166405
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PARD6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425492 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pard6b codifica a PARD6B, um componente central do complexo de polaridade PAR que coopera com PRKCZ/PRKCI e PARD3 para estabelecer a polaridade ápico-basal e organizar as junções epiteliais. Ao se acoplar a CDC42 e regular o citoesqueleto de actina, PARD6B influencia a montagem das junções oclusivas (tight junctions), a divisão celular assimétrica e a migração dirigida durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual. A perturbação da sinalização do complexo PAR está amplamente associada a defeitos na função de barreira epitelial e à morfogênese desregulada, processos frequentemente alterados em modelos de progressão tumoral e metástase. Em sistemas murinos, Pard6b é comumente estudado no contexto de sinalização dependente de polaridade, remodelamento juncional e especificação de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PARD6B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pard6b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pard6b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pard6b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PARD6B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pard6b para a investigação da sinalização de PARD6B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pard6b críticos para a função PARD6B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pard6b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PARD6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PARD6B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pard6b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PARD6B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PARD6B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pard6b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pard6b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.