Papilin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406332

Descripción general

PAPLN codifica la papilina, una gran glicoproteína asociada a la matriz extracelular, caracterizada por múltiples dominios modulares de interacción que favorecen la organización de la matriz y la arquitectura de la membrana basal. La papilina participa en la regulación de proteasas extracelulares y en la remodelación de la matriz, procesos que influyen en la adhesión celular, la migración y la morfogénesis tisular. A través de estas funciones dirigidas por la matriz, PAPLN es relevante para vías que vinculan la dinámica de la matriz extracelular con programas de remodelación del desarrollo y patológicos, incluidos contextos en los que la proteólisis alterada y la organización del estroma contribuyen a la biología de la enfermedad. El estudio de PAPLN respalda el trabajo mecanístico sobre la homeostasis de la matriz extracelular y las interfaces de señalización célula–matriz.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Papilin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PAPLN en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PAPLN junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PAPLN tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Papilin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PAPLN para la investigación de la señalización de Papilin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PAPLN críticos para la función de Papilin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PAPLN para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Papilin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Papilin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PAPLN. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Papilin (h) y el plásmido HDR Papilin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PAPLN para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PAPLN definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.