Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PAP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403906
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAP-α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAP-α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403906 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PAPOLA codifica a polimerase poli(A) alfa (PAP-α), um componente catalítico central da maquinaria de processamento da extremidade 3′ do mRNA, que adiciona caudas poli(A) aos pré-mRNAs após a clivagem em sítios de poliadenilação. Ao controlar o comprimento da cauda poli(A) e ao atuar em conjunto com fatores de especificidade de clivagem e poliadenilação, a PAP-α influencia a estabilidade do mRNA, a exportação nuclear e a eficiência de tradução, moldando assim programas globais de expressão gênica. A poliadenilação alternativa dependente de PAPOLA contribui para a diversidade de isoformas de transcritos e pode remodelar a regulação pós-transcricional durante a proliferação e a diferenciação. Padrões desregulados de processamento da extremidade 3′ e de poliadenilação estão implicados na biologia do câncer e em outros distúrbios do controle da expressão gênica, tornando a PAP-α um alvo útil para estudos mecanísticos do metabolismo de RNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAP-α (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAPOLA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAPOLA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAPOLA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAP-α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAPOLA para a investigação da sinalização de PAP-α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAPOLA críticos para a função PAP-α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAPOLA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PAP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAPOLA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAP-α Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PAP-α (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAPOLA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAPOLA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.