Plasmide Double Nickase (m) Pannexin-1: sc-424967-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Pannexin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Pannexin-1 Double Nickase (m) et le plasmide Pannexin-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Panx1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Pannexin-1 | sc-424967-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Pannexin-1 | sc-424967-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Panx1 code la pannexine‑1, un canal membranaire à large pore qui permet la libération d’ATP et de métabolites, modulant ainsi la signalisation purinergique autocrine et paracrine. L’activité de la pannexine‑1 est recrutée en aval de la stimulation du récepteur P2X7 et de signaux inflammatoires, reliant la dépolarisation membranaire et des voies associées aux caspases à la signalisation extracellulaire par les nucléotides. Dans les tissus murins, Panx1 contribue à l’activation des cellules immunitaires, aux réponses liées à l’inflammasome et à une dynamique calcique coordonnée, avec en outre des rôles dans la régulation du tonus vasculaire et la communication neurogliale. Une libération d’ATP dépendante de PANX1 dérégulée a été impliquée dans des modèles de neuroinflammation, de lésions ischémiques et de signalisation aberrante de la mort cellulaire, faisant de Panx1 une cible utile pour des études mécanistiques de l’inflammation et des réponses au stress.
Pannexin-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Panx1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Panx1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Panx1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Panx1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.