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p73双切口酶质粒(h) | sc-416822-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p73双切口酶质粒(h2) | sc-416822-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP73 编码 p73,p73 属于 p53 家族的转录因子,可在细胞应激与发育信号的驱动下调控细胞周期控制、细胞凋亡以及分化程序。通过不同同工型的特异性作用,p73 影响 DNA 损伤信号传导、线粒体介导的凋亡,以及维持上皮完整性与神经发育的转录网络。p73 的功能与 ATM/ATR 介导的应答以及 p53 家族的交叉调控等通路相互交织,从而塑造包括细胞衰老与存活在内的多种结局。TP73 表达失衡或同工型比例异常与肿瘤发生过程、神经发育表型以及应激适应改变有关,因此是开展转录调控机制研究的一个重要节点。
p73 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TP73 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TP73内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TP73的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TP73基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。